Wissen Bioprozess- und Biotechnologieausbildung Wie wird die theoretische maximale Trockenmassekonzentration von Zellen in Pilotanlagen für die Bioprozessfermentation berechnet? Formel und Grenzen
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Technisches Team · LABPARK

Aktualisiert vor 2 Monaten

Wie wird die theoretische maximale Trockenmassekonzentration von Zellen in Pilotanlagen für die Bioprozessfermentation berechnet? Formel und Grenzen


Die theoretische maximale Konzentration der Zell-Trockenmasse wird berechnet, indem der maximale Volumenanteil gepackter Zellen mit der Nasszelldichte und dem Trockenstoffanteil multipliziert wird. Bei einem maximalen Zellvolumenanteil von 60 %, einer Nasszelldichte von 1,1 g/cm³ und einem Trockenstoffanteil von 25 % ergibt sich ein Wert von 165 g Trockenzellmasse pro Liter Fermentervolumen.

Die Berechnung stellt eine physikalische Packungsgrenze und kein normales Betriebsziel dar:
Maximale DCW = Zellvolumenanteil × Nasszelldichte × Trockenstoffanteil
= 0.60 × 1,100 g/L × 0.25 = 165 g DCW/L.

Herleitung des Maximums

Bestimmung des verfügbaren Zellvolumens

Dicht gepackte Zellen können nicht das gesamte Fermentervolumen einnehmen, da zwischen ihnen mit Flüssigkeit gefüllte Zwischenräume verbleiben. Die zugrunde gelegte Annahme ist, dass die Zwischenraumflüssigkeit mindestens 40 % des Volumens einnimmt.

Daher beträgt der maximale Volumenanteil der Nasszellen:

[ \phi_{\text{wet}} = 1 - 0.40 = 0.60 ]

Das bedeutet, dass Nasszellen unter der angenommenen Packungsgrenze höchstens 60 % jedes Liters einnehmen können.

Umrechnung des Zellvolumens in Nasszellmasse

Die Nasszellmasse wird mithilfe der Nasszelldichte berechnet:

[ C_{\text{wet,max}} = \phi_{\text{wet}}\rho_{\text{wet}} ]

Bei einer Nasszelldichte von:

[ 1.1\ \text{g/cm}^3 = 1,100\ \text{g/L} ]

beträgt die maximale Nasszellkonzentration:

[ C_{\text{wet,max}} = 0.60 \times 1,100 ]

[ C_{\text{wet,max}} = 660\ \text{g Nasszellen/L} ]

Umrechnung der Nassmasse in Trockenzellmasse

Mikrobielle Biomasse wird üblicherweise mit 25 % Trockenstoff und 75 % Wasser angenähert. Unter Anwendung des Trockenstoffanteils ergibt sich:

[ C_{\text{DCW,max}} = C_{\text{wet,max}}f_{\text{dry}} ]

[ C_{\text{DCW,max}} = 660 \times 0.25 ]

[ \boxed{C_{\text{DCW,max}} = 165\ \text{g DCW/L}} ]

Dies ist das theoretische Maximum unter den genannten Annahmen.

Die allgemeine Berechnung

Grundformel

Der allgemeine Ausdruck lautet:

[ \boxed{ C_{\text{DCW,max}}

\phi_{\text{wet}} \times \rho_{\text{wet}} \times f_{\text{dry}} } ]

Dabei gilt:

  • (C_{\text{DCW,max}}) ist die theoretische maximale Konzentration der Trockenzellmasse.
  • (\phi_{\text{wet}}) ist der maximale Volumenanteil der Nasszellen.
  • (\rho_{\text{wet}}) ist die Nasszelldichte.
  • (f_{\text{dry}}) ist der Anteil der Nassbiomasse, der aus Trockenstoff besteht.

Wenn stattdessen der minimale Hohlraumanteil bekannt ist, berechnen Sie:

[ \phi_{\text{wet}} = 1 - \phi_{\text{void}} ]

Einheitliche Verwendung

Die Dichte muss in Einheiten angegeben werden, die mit der gewünschten Konzentration kompatibel sind. Da gilt:

[ 1\ \text{cm}^3 = 1\ \text{mL} ]

und:

[ 1\ \text{g/cm}^3 = 1,000\ \text{g/L} ]

wird eine Nassdichte von 1,1 g/cm³ vor der Verwendung in der Gleichung in 1.100 g/L umgerechnet.

Beispiel für eine Pilotanlage

Für einen Fermenter mit einem Arbeitsvolumen von 100 L beträgt die entsprechende theoretische Gesamtmasse der Trockenzellen:

[ 100\ \text{L} \times 165\ \text{g DCW/L}

16,500\ \text{g DCW} ]

[ \boxed{16.5\ \text{kg DCW}} ]

Diese Berechnung schätzt die gesamte Trockenbiomasse nur dann, wenn das gesamte angegebene Volumen als Fermentervolumen mit der angenommenen Maximalkonzentration betrachtet wird.

Was diese Grenze darstellt

Eine physikalische Packungsgrenze

Das Ergebnis wird durch Zellvolumen, Zelldichte, Wassergehalt und den zwischen den Zellen erforderlichen Raum bestimmt. Es beschreibt, wie viel Trockenbiomasse theoretisch im Behälter Platz finden könnte, wenn die Zellen einen idealisierten maximalen Packungszustand erreichen würden.

Es ist daher am besten als geometrische und stoffliche Obergrenze zu verstehen.

Keine Substratausbeute

Diese Berechnung bestimmt nicht, wie viel Biomasse aus Glucose, Ammoniak oder einem anderen Substrat erzeugt werden kann. Die substratbasierte Biomasseausbeute ist eine separate Einschränkung, die durch Kohlenstoffbilanz, Stickstoffverfügbarkeit, Energiebedarf und Thermodynamik bestimmt wird.

Ein Prozess kann seine Substratausbeute lange vor dem Erreichen der physikalischen Packungsgrenze ausschöpfen.

Keine Produktivitätsberechnung

Die Konzentrationsgrenze gibt außerdem nicht an, wie schnell Biomasse erzeugt werden kann. In einem kontinuierlichen Reaktor wird die volumetrische Biomasseproduktivität üblicherweise wie folgt angegeben:

[ P_X = D X ]

wobei (D) die Verdünnungsrate und (X) die Biomassekonzentration ist.

Die Verdünnungsrate muss unabhängig von der theoretischen Maximalkonzentration mit der Wachstumskinetik und der Vermeidung eines Auswaschens vereinbar bleiben.

Verständnis der Zielkonflikte

Ideale Packung ist keine normale Fermentation

Eine gut durchmischte Fermentationsbrühe ist nicht mit einem statischen Bett aus dicht gepackten Zellen gleichzusetzen. Rühren, Gasblasen, Viskosität, Morphologie, Scherkräfte und Flüssigkeitszirkulation beeinflussen sämtlich die erreichbare Konzentration.

Die Annahme eines Zellvolumenanteils von 60 % sollte daher als idealisierte Grenze und nicht als gewöhnlicher Betriebspunkt einer Pilotanlage betrachtet werden.

Die Zellzusammensetzung variiert

Der Trockenstoffanteil von 25 % ist eine Näherung. Der tatsächliche Wert ändert sich in Abhängigkeit von Organismus, Wachstumsphase, Substrat, osmotischen Bedingungen und Messmethode.

Wenn der gemessene Trockenstoffanteil 20 % statt 25 % beträgt, ergeben dieselben Annahmen zu Packung und Dichte:

[ 0.60 \times 1,100 \times 0.20

132\ \text{g DCW/L} ]

Dichte und Volumenbasis sind entscheidend

Fermentationssysteme unterscheiden zwischen dem Gesamtvolumen des Behälters, dem Arbeitsvolumen, dem Flüssigkeitsvolumen und dem Volumen der geernteten Brühe. Die Anwendung des Ergebnisses auf die falsche Volumenbasis kann die gesamte Biomassekapazität überschätzen.

Berechnungen für Pilotanlagen sollten eindeutig angeben, ob die Konzentration pro Liter Arbeitsbrühe oder pro Liter Fermenterkapazität angegeben wird.

Der Sauerstofftransfer kann limitierend werden

Bei hohen Zellkonzentrationen können der Sauerstoffbedarf und die Kohlendioxidentfernung das Wachstum begrenzen, bevor die physikalische Packung relevant wird. Auch Durchmischung und Wärmeabfuhr können bei steigender Brühenviskosität limitierend werden.

Diese verfahrenstechnischen Einschränkungen machen das physikalische Maximum zu einem Maßstab für die Machbarkeitsanalyse und nicht zu einem garantierten Prozessendpunkt.

So wenden Sie dies auf Ihr Projekt an

Führen Sie zunächst die physikalische Berechnung durch und vergleichen Sie sie anschließend mit biologischen und anlagentechnischen Einschränkungen.

  • Wenn Ihr Hauptfokus auf der Schätzung der absoluten Konzentrationsobergrenze liegt: Multiplizieren Sie den maximalen Nasszellanteil mit der Nasszelldichte und dem Trockenstoffanteil; die genannten Annahmen ergeben 165 g DCW/L.
  • Wenn Ihr Hauptfokus auf der Auslegung einer Ernte- oder nachgeschalteten Einheit einer Pilotanlage liegt: Multiplizieren Sie die geschätzte Konzentration mit dem tatsächlichen Arbeitsvolumen und berücksichtigen Sie dabei den Unterschied zwischen Arbeitsvolumen und dem Gesamtkapazitätsvolumen des Behälters.
  • Wenn Ihr Hauptfokus auf der Vorhersage der erreichbaren Fermentationsleistung liegt: Betrachten Sie das Packungsergebnis lediglich als Obergrenze und bewerten Sie separat Substratausbeute, Sauerstofftransfer, Durchmischung, Wärmeabfuhr, Viskosität, Morphologie und Auswaschrisiko.
  • Wenn Ihr Hauptfokus auf der Verbesserung der Berechnungsgenauigkeit liegt: Ersetzen Sie den angenommenen Hohlraumanteil von 40 %, die Nassdichte von 1,1 g/cm³ und den Trockenstoffanteil von 25 % durch Messwerte, die für den jeweiligen Organismus und die Betriebsbedingungen spezifisch sind.

Die theoretische maximale Trockenmassekonzentration der Zellen beträgt daher 165 g DCW/L unter den genannten Annahmen, während die in einer Pilotanlage erreichbare Konzentration durch biologische und verfahrenstechnische Grenzen bestimmt werden muss.

Zusammenfassungstabelle:

Parameter oder Erkenntnis Wert / Formel Bedeutung
Maximaler Volumenanteil der Nasszellen 60 % Basiert auf einem minimalen Zwischenraumanteil von 40 %
Nasszelldichte 1,1 g/cm³ = 1.100 g/L Wandelt Zellvolumen in Nassbiomassemasse um
Trockenstoffanteil 25 % Stellt den trockenen Anteil der Nassbiomasse dar
Maximale Nasszellkonzentration 0.60 × 1,100 = 660 g/L Theoretische Nassbiomassekonzentration
Maximale Konzentration der Trockenzellmasse 0.60 × 1,100 × 0.25 = 165 g DCW/L Obergrenze aufgrund physikalischer Packung und Zusammensetzung
Gesamte Trockenbiomasse bei 100 L 100 × 165 = 16,5 kg DCW Wendet die Konzentration auf das Arbeitsvolumen des Fermenters an
Wichtigste praktische Einschränkungen Sauerstofftransfer, Durchmischung, Wärmeabfuhr, Viskosität, Morphologie und Substratausbeute Tatsächliche Betriebskonzentrationen liegen üblicherweise unter dem physikalischen Maximum

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